猪精保存温度与存活时间(猪精保存多长时间)

猪精液的保存对精液的质量维持至关重要,目前猪液态精液的保存还是主流,但在国际贸易中冻精是较受欢迎的,而近些年猪冻精发展迅速,其中的保存方法也有了一些新的尝试。

1 冻精的保存

猪精保存温度与存活时间(猪精保存多长时间)插图

猪精子对低温比较敏感, 单次用量大,而常温保存也能满足用量需求,随着牛等冻精的发展,对优良品种的需求、跨国运输的成本以及生物安全的内在要求,使得猪冻精得到一定发展。目前,精液冷冻保存的方法有液氮保存、干冰保存。陈明明(2016)等介绍-80 ℃超低温冰箱中冷冻保存猪精,通过添加甘氨酸7.5 mg/mL,柠檬酸含量1.3%,甘油浓度3% 为基础液进行冻存,在61 ℃解冻,存活率达到61%。在精液的解冻与冷冻过程中,都会使精子质膜受到损伤,因此,需要在解冻过程中快速越过-60 ℃的和 -15 ℃的的两个临界温度区。

如果解冻的温度达到69 ℃,解冻后的精子存活率会下降。

2 液态精液的保存

猪精保存温度与存活时间(猪精保存多长时间)插图1

我国规模化猪场95% 以上使用液态保存精液,少部分使用冷冻精液。在猪商品化生产中,精液液态保存的条件、保存后的使用效果是确保人工授精成功的关键技术,相对而言越新鲜的精液受胎率越高,保存2 d 的精液受胎率一般为60% ~ 70%,到第5 d 时,分娩率降至50%(孙梦等,2019)。研究发现,精子内钙离子浓度升高,猪精液保存的一些方法使精子获能,进而使其老化死亡,加入螯合剂后可降低精子内钙离子浓度,减少精子的死亡,乙二

胺四乙酸(EDTA)与乙二醇双(2-氨基乙基醚)四乙酸(EGTA)都可使钙离子浓度降低,孙梦等认为EGTA 更有优势,添加3 mmol/L 则对精液保存有促进作用,进而可提高精子的受精率及胚胎发育能力。

在17 ℃恒温箱保存时,筛选正常大气压、-0.02 MPa、-0.04 MPa、-0.08 Mpa, 研究发现,-0.04 MPa 条件可降低超氧阴离子自由基(O2-)、H2O2、羟自由基(OH-),对提高猪精子活率、减少精子的呼吸代谢和降低氧化有帮助,可延长保存时间。

高效稳定的稀释粉配方是该领域的研究方向,天然物质的添加对精液液态保存有帮助,如TPP,它主要由儿茶素、黄酮类、酚酸类和花色素类等物质组成,其中儿茶素类在抗氧化活性中起重要作用,试验发现在添加0.04 g/L 的TPP 时,保存5 d 的精子活率大多在60% 以上。可利用诱导细胞休眠的方式来延长猪精液的保存时间,使用冬眠合剂(氯丙嗪和异丙嗪),在8 ℃低温稀释液中,添加冬眠合剂保存9 d 后,精子活率可以达到60%。黄芪多糖对猪精液低温保存有帮助,黄芪多糖具有抗衰老、抗氧化、抗病毒、抗细胞凋亡、抗应激等作用,效果最好的添加浓度为0.3 g/L,但对于黄芪多糖保护猪精子的机制目前并不清楚,但是该方法开拓了思路。

猪精保存温度与存活时间(猪精保存多长时间)插图2

随着物流运输的便利性, 个性化需求,尤其是近些年引种风险增加,出于生物安全的考虑,对冻精及精液液态运输带来新的契机,可操作性强,效果稳定的技术将是规模场、家庭农场、散养户的追求。

3 非洲猪瘟后的猪精发展

非洲猪瘟疫情发生以来,一些地方,经历了恐慌性抛售,导致清栏。国家为了满足市场猪肉的需求,陆续推出宽松政策鼓励养猪,减少养猪成本,目前种猪的需求量持续旺盛,连续3 个月环比增长,一猪难求,种猪更难求,猪精市场更是持续火爆,从非洲猪瘟暴发前的数十元到目前的数百元。猪精液以安全性高,方便性强成为市场新宠,大多以新鲜精液为主。