tm值（tm值与退火温度的关系）

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只需三步，即可完成克隆在质粒上的DNA序列的定点编辑！聚合美M5 Site-Directed Mutagenesis Kit可用于10-20kb的质粒的定点突变，多达五个位点的单点突变或者基因片段的插入和删除，一天搞定，突变率达100%，让实验变得简单起来！

MF129-01

M5 HiPer Site-Directed Mutagenesis Kit

产品详情

聚合美超高效点突变试剂盒用于克隆在质粒上的DNA序列的定点编辑，可实现快速高效的密码子突变、插入或缺失等改变，支持大片段序列的插入和删除，配合推荐的引物设计方法，突变效率可达100%。可以广泛应用于基因及蛋白质的功能研究。

产品特点

各种模板多种突变：

可以完成一次最多五个位点的单点突变，高效进行基因片段的删除、插入等操作，进快速进行载体的构建。

操作简单：

预混mix方便使用，只需设计引物，聚合美特制超保真酶扩增，M5-Remase(10U/μl)消化转化感受态三个过程，一天内完成实验！

可靠高效：

聚合美特制超保真酶M5-Muta配合推荐的引物设计方法，突变效率可达100%，超保真酶可以确保不引入新的突变，更可靠！

点突变引物设计：“非对称”引物设计

·即突变位点不要位于两条引物的中央，而是采取下图的排布方式，保证两条突变引物的3’端与原始质粒完全匹配的序列的Tm值均达到58-68°C

·图中所示为将原始质粒上AT替换为GC，引物的上引入突变位点的位置更靠近5’端，使两条引物的5’端相重叠的序列的Tm值达到48-53°C；同理设计插入和删除突变的引物

·如对引物设计不熟悉，推荐采取在线引物设计，见说明书

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